BrdU

EdU

原理

 BrdU為胸腺嘧啶衍生物，可與胸苷競爭摻入DNA，再用抗BrdU單抗，經(jīng)ICC染色，顯示增殖細胞。

EdU是一種胸腺嘧啶脫氧核苷類似物，可代替胸苷摻入正在復(fù)制的DNA分子中，通過EdU與熒光標(biāo)記特異性反應(yīng)快速檢測DNA復(fù)制活性。

檢測分子

大

很小，BrdU抗體的1/500

檢測方式

免疫反應(yīng)

化學(xué)反應(yīng)

影響其他標(biāo)記

是

否

DNA變性

需要

不需要

實驗時間

過夜

2.5h

檢測敏感度

一般

靈敏

植物細胞檢測

需消化細胞壁，細胞壁消化酶常含雜質(zhì)，甚至破壞細胞形態(tài)表征，降低準(zhǔn)確性

無需消化細胞壁即可完成檢測，檢測便捷準(zhǔn)確

優(yōu)缺點

破壞了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，影響了其他染料的結(jié)合染色，出現(xiàn)染色彌散，準(zhǔn)確性降低

染料易擴散特異性好，不破壞DNA和核的結(jié)構(gòu)，避免樣品損傷，無需抗原抗體反應(yīng)，可準(zhǔn)確反映細胞和組織水平DNA復(fù)制活性

EdU應(yīng)用

詳情

動物活體注射實驗

EdU適用于各種動物活體注射，穩(wěn)定無副作用，檢測時間可以從幾小時至數(shù)十天，也適用于石蠟或冰凍組織切片檢測，完全滿足動物細胞增殖的檢測，是全面分析組織或器官細胞增殖的理想工具。

植物成像實驗

EdU分子小可透過細胞壁，無需DNA變性和抗原抗體反應(yīng)，可準(zhǔn)確檢測植物生長發(fā)育分化等性狀的細胞增殖情況，其適用于各種單/雙子葉植物的細胞增殖檢測。

細胞標(biāo)記示蹤

標(biāo)記示蹤可直觀了解細胞在體內(nèi)的分布，還可追蹤其體內(nèi)的分化轉(zhuǎn)化及調(diào)控機制。EdU能競爭性地滲入正在復(fù)制的DNA分子，從而達到標(biāo)記分裂細胞的目的，簡單快速準(zhǔn)確示蹤細胞，示蹤標(biāo)記時間長達6周，遠勝于BrdU。

DNA損傷修復(fù)檢測

代謝活動和環(huán)境因素（如紫外線）等能造成人體細胞DNA分子結(jié)構(gòu)的破壞，進而改變細胞閱讀信息和基因編碼的方式。DNA損傷修復(fù)須經(jīng)常運行，快速改正DNA結(jié)構(gòu)的任何錯誤。EdU可快速有效標(biāo)記，細胞核的熒光強度跟DNA損傷修復(fù)活性成正相關(guān)。

線粒體活性檢測

線粒體是動物細胞的一種半自主細胞器，具有自身特異的DNA分子。這類環(huán)狀雙鏈DNA記載了線粒體的遺傳信息。采用EdU可以同時標(biāo)記線粒體DNA，結(jié)合APH即可實現(xiàn)針對線粒體DNA復(fù)制活性的檢測。

病毒增殖活性檢測

病毒DNA復(fù)制是病毒增殖的一個重要表現(xiàn)，采用EdU方法可快速檢測病毒DNA的復(fù)制活性，并掌握病毒增殖的位點。